Диагностика

Диагностика – распознавание причин патологического состояния и постановка диагноза путем тщательного и всестороннего исследования больного организма (растения) [2] . В рамках фитопатологии, как науки, диагностика сегодня является обособленным направлением, представляющим крупное научное течение, занимающееся изучением и совершенствованием методов распознавания болезни растения [4] .

Постановка диагноза – это установление типа болезни, его характера (инфекционное или неинфекционное), причины, возбудителя заболевания и выбор соответствующих мер борьбы.На данном этапе развития науки имеются несколько методов диагностики: макроскопический (патографический), микроскопический, микологический, химический, физический, молекулярный [2] . Наиболее прогрессивной является молекулярная диагностика [5] .

Содержание:

• Макроскопический (патографический, визуальный) метод диагностики
• Микроскопический метод диагностики
• Микологический метод диагностики
• Физический метод диагностики
• Молекулярные методы диагностики

Макроскопический (патографический, визуальный) метод диагностики

Макроскопический метод диагностики – позволяет ставить диагноз по видимым невооруженным глазом внешним признакам (симптомам). При необходимости используется незначительное увеличение (лупа, бинокль) [2] .

При использовании этого метода для правильной постановки диагноза необходимо:

• проанализировать большое количество растений, поскольку совокупность всех признаков заболевания встречается не на всех растениях или симптомы не всегда выражены ясно;
• тщательно осмотреть и оценить состояния больных растений от корней до вершины (точки роста);
• проанализировать условия местопроизрастания объекта;
• установить причины, способствовавшие возникновению болезни растения (антропогенные факторы, неблагоприятные погодные условия, поражение другими болезнями, повреждения насекомыми) [5] .

Исследование образца растения в лаборатории

Микроскопический метод диагностики

Микроскопический метод диагностики – исследование с помощью микроскопа спороношения возбудителя заболевания или пораженных тканей растения [2] .

Этот метод применяется для установления наличия патогена в тканях больного растения, то есть определения характера заболевания, и определения вида возбудителя болезни [2] .

Метод микроскопирования дает возможность установить наличие характерных признаков спороношения, свойственных тому или иному патогену и с помощью определителя установить его систематическое положение [2] .

Выращивание Sclerotinia sclerotiorum на питательной среде.

Микологический метод диагностики

Микологический метод диагностики – выделение инокулюма патогена из пораженных частей растения, его изоляции и выращивания (культивирования) на подходящей питательной искусственной или естественной среде [3] [2] .

Культивирование патогенов включает три основных этапа:

• подготовка образцов естественных субстратов (почвы, органов растений, растительных остатков), из которых осуществляют высев на обычные или элективные питательные среды, способные обеспечить развитие одного или группы родственных видов;
• выделение и получение чистой культуры патогена на питательных средах;
• пересев чистых культур на дифференциально-диагностические среды для определения их видовой принадлежности [3][2] .

Физический метод диагностики

Физический метод диагностики – основан на различных свойствах семян, тканей и органов больных и здоровых растений. Органы больных растений исследуются на резонанс, свечение в ультрафиолетовых лучах, цвет клеточного сока, электропроводность, плотность [2] .

В частности, качество семян можно определить по плотности, поскольку у больных и здоровых семян она различна. Скрытую гниль древесины первоначально устанавливают путем выстукивания, поскольку здоровые и фаутные стволы издают разные звуки [2] .

К физическим методам диагностики относится метод идентификации патогена с помощью индикаторного растения – метод индикаторных растений. Он основан на использовании растений-индикаторов, дающих специфичные симптомы, характерные для определенного вида возбудителя болезни. Метод индикаторных растений широко используется для идентификации вирусных, вироидных, фитоплазменных заболеваний [1] .

Молекулярные методы диагностики

Молекулярные методы диагностики – комплекс методов молекулярной детекции фитопатогенов, позволяющие провести точную диагностику на любой стадии развития заболевания [5] .

Различают три группы методов:

1. Первая группа методов основана на выявлении специфичных химических соединений (маркерных молекул) для конкретного патогенна. В качестве маркерных молекул используются жирные кислоты, хинин, эргостерин. Наличие метаболитов выявляется с помощью хроматографии [5] .
2. Вторая группа методов – спектр приемов иммунной диагностики. Эти методы сводятся к формированию в образце комплексов «антиген – антитело» и последующей визуализации полученных комплексов. Для визуализации применяют различные способы: фотометрия, флуореметрия, микроскопия иммунопреципитатов [4] .
3. Третья группа методов основывается на различных вариантах протекания полимеразной цепной реакции (ПРЦ). Маркерные последовательности ДНК возбудителей болезни амплифицируются и визуализируются с помощью флуореметрии, электрофореза в ходе «ПЦР в реальном времени». Важное преимущество этой группы методов – возможность установления наличия и определения вида патогена даже при его незначительном (следовом) количестве [5] .

Большинство методов молекулярной диагностики характеризуются быстротой и простотой использования, позволяющей проводить исследования в условиях передвижных мини-лабораторий. На основе методов молекулярной диагностики выпускаются различные коммерческие наборы для выявления патогенов – диагностикумы [5] .

Лаборатория листовой диагностики ФЭД

• В наличии

Лаборатория листовой диагностики ФЭД

Минимальная сумма заказа 5 000 руб!

Лаборатория функциональной диагностики растений (ФЭД) (лаборатория листовой диагностики)

Лаборатория функциональной диагностики растений(листовая диагностика растений) фотоколориметрическим методом анализа. Определение потребности растений в макро- и микроэлементах на основе функциональной диагностики.

Комплект поставки

• фотоколориметр «Экотест-2020»,
• лабораторная посуда, штатив на 40 пробирок,
• дозаторы,
• набор химреактивов с красителем на 10 000 анализов,
• упаковка (ящик пластиковый на колесиках)
• Руководство по выполнению анализов ФЭД с примерами расчета.

Методика определения потребности растений в макро- и микроэлементах на основе функциональной диагностики

Методы диагностики питания растений подразделяют на почвенные и растительные. Растительная диагностика, в свою очередь, включает визуальную, химическую и функциональную.

Визуальная диагностика является наиболее простым методом, не требующим специального оборудования, она позволяет относительно быстро установить нарушения в минеральном питании и устранить их причины. Однако, для успешного выполнения визуальной диагностики помимо знаний необходим значительный практический опыт, так как, недостатки и избытки разных элементов часто выглядят внешне очень похоже. Кроме того, часто внешние признаки нарушений питания растений проявляются только тогда, когда из-за этих нарушений уже произошли необратимые потери урожая.

Химическая диагностика минерального питания (тканевая или листовая) позволяет определить химический состав растения в данный момент. Только при постоянном обеспечении необходимыми элементами питания в оптимальных соотношениях на протяжении всего вегетационного периода возможно максимальное использование биологического потенциала каждого сорта. Однако, иногда элемент питания накапливается в растении не вследствие его необходимости для развития. Кроме того, недостаток или избыток одного из элементов может нарушать поступление в растение другого элемента. Эти факторы ограничивают возможности применения методов химической диагностики.

Функциональные методы диагностики позволяют оценить не содержание того или иного элемента питания, а потребность растения в нем. Потребность растений в элементах можно оценить, контролируя интенсивность физиолого-биохимических процессов. А.С. Плешковым и Б.А. Ягодиным (1982) разработан принцип диагностики питания растений по определению фотохимической активности хлоропластов.

Принцип данного метода заключается в следующем. Определяют фотохимическую активность суспензии хлоропластов, полученной из средней пробы листьев диагностируемых растений, затем в суспензию хлоропластов добавляют элемент питания в определенной концентрации и вновь определяют фотохимическую активность суспензии. В случае повышения фотохимической активности суспензии хлоропластов по сравнению с контролем (без добавления элементов) делается вывод о недостатке данного элемента, при снижении об избытке, при одинаковой активности – об оптимальной концентрации в питательной среде.

Подготовка оборудования и реактивов для листового анализа

В качестве основного прибора, для анализа используется Фотоколориметр «Экотест-2020».
Для анализа используют 3-4-й лист (сверху) взрослых растений или целиком молодые растения. В случае, когда трудно определить 3-4-й лист (например, в теплицах после перегибания плети через шпалеру) отбирают молодые, незагрубевшие хорошо освещаемые листья. В среднюю пробу отбирают растения наиболее характерные для исследуемой площади. На одну пробу должно приходиться не менее 200 точек отбора листьев (отбирается часть листа площадью 2-3 см2), расположенных равномерно по всей площади. При слабой выравненности грунтов по химическому составу с участков, на которых растения имеют выраженные нарушения в своем развитии, необходимо отбирать отдельные пробы. Отбор проб листьев производят в полиэтиленовые пакеты. Срок доставки листьев для анализа должен быть по возможности коротким – не более 30-40 мин. Однако, при хранении проб в холодильнике при температуре +5-6°С, он может быть увеличен до 2-3 часов.

Метод позволяет в течение 40-50 минут определить потребность любых растений в 12-15 макро- и микроэлементах питания и дать рекомендации по проведению корневых и некорневых подкормок, что особенно важно при введении новых сортов и при расширении ассортимента культур. Данный метод может использоваться для диагностики питания растений, выращиваемых, как на грунтах, так и на гидропонике

Экспрессность метода позволяет перед каждой подкормкой растений количественно определить потребность в макро- и микро- элементах и скорректировать питание растений в каждом поле (вплоть до отдельного растения) по азоту, фосфору, калию, кальцию, магнию, бору, меди, цинку, железу, марганцу, молибдену, кобальту, иоду.

Данный метод используется более чем в 130 хозяйствах России, Белоруссии и Украины, в том числе в Ивановской области (“Тепличный”) с 1990 года, а в Московской области (“Белая дача”) с 1992 года. Использование метода в производстве показало его высокую эффективность.

https://www.pesticidy.ru/dictionary/Diagnostics
https://agroresurs-ltd.ru/p53402171-laboratoriya-listovoj-diagnostiki.html